当香蕉遇上液氮

看过the big bang theory的一定记得有一集莱斯里将香蕉扔到液氮里敲碎了和麦片吃...(原因是没有knife...)
最近正好有根香蕉没事干,就照做了一下(小孩请在大人指导下操作...).

首先当然是准备了一个装有液氮的容器....泡沫盒是比较方便的了,实验室俗称"冰盒",装入适量液氮,然后就把香蕉剥皮扔进去...等待了3分钟,估计冻的差不多了...

PyMOL--一款强大的开源分子可视化系统

最近由于在课题中发现氨基酸序列在pfam中又有了新的预测结果(SMART中没有,看来pfam数据更新更频繁),于是又需要进行一些序列的二级及三级结构简单预测,并进行相关的观察,由于很久没有搞这些东西了,有点生疏,于是重新尝试看pdb文件的软件,以前用的protein exploreryasara感觉不太好用了...于是又发现了一个很不错的开源分子可视软件--PyMOL (下载).

比起yasara, PyMOL运行更迅速,跨平台(mac, win和linux都能用), 虽然yasara的渲染很不错,不过PyMOL也能导出为povray格式进行渲染.Protein explorer太老了,只能运行于firefox2.0以下和IE6, 我的电脑上都没有.

PyMOL打开界面分3块,viewer,console和GUI(如图), 一般来说大部分简单的观察通过viewer就行了, 操作不是很复杂. 举个列子,如果要用cartoon形式观察蛋白分子,打开pdb文件,比较乱,可以先hide everything, 然后选择show cartonn(其他依次类推,show surface,show ribbon等等), 然后进行上色, 即color, 比如 by ss -> helix sheet loop 就将分子按照螺旋, 折叠和loop进行染色, 方便观察比较.

DNA序列反向互补工具--php tool

这两天看了些php的应用,发现php网络应用真是方便...根据前几章关于string的知识写个生物小应用复习下. 以前总是利用网上的dna反向互补工具,但是有时候不能连接,后来用了sms,非常方便,支持下载到本地使用.自己用用php也不错, 练习练习代码.

主要实现以下功能:
1.反向互补....
2.去除多余字段(数字,空格,主要ncbi上下来的序列多含有数字和空格)
3.提示含有非碱基字符,有些时候SNP的出现需要保留

未实现功能:
本来想在原始序列中突出显示非碱基字母,比如红色显示,结果没有成功....substr_replace()无法应用在上面...暂时看到的知识想不出其他解决方案了,先等等吧,下次会了再改,反正问题不大.

演示: DNA rev-complement tool
代码:(有点乱,有些地方觉得能简洁,但似乎没有找到可行的简洁之法,主要是去除序列中数字那段,后来发现ereg_replace()能实现,方便多了)

imageJ使用教程之--样本长度测量

imagej-logo.gif最近实验室突然有个师姐问我imageJ的测量方法....以前虽然用来细胞计数,不过早忘了怎么用了,重新开始琢磨,经过师兄的协助,简单整理下imageJ测量图片中样本长度的方法.

1.去官网下载imageJ程序,安装后运行,打开所需图片,选择直线工具(主工具栏straight line),对照拍照时的标尺画出一根同样长度的线,如下图.如果需要精确,可以按ctrl+增大图像.

Real-Time(RT)定量PCR仪器rotor-gene操作使用教程

去年做过一次Real-Time PCR(RT-PCR),最近又要做,却突然发现已经忘了怎么操作rotor-gene这个软件了,看来有时记录还是很重要的,尤其是做的次数少的实验,所以整理下操作步骤.下次简单记录下后期数据的分析处理.由于操作的是rotor-gene和SYBR Green I,所以底下以此为做法操作.

1.运行软件,选择SYBR Green(R) I (如果使用taqman探针,则选择dual labeled probe程序)
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Rice Atlas Database -- 一个水稻表达图表数据库

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虽然叫做Rice Atlas Database,不过其实并没有收入水稻所有时期组织的表达情况.主要就是苗的根和叶及其相关组织,根尖,表皮等等,没有花和茎.作为参考就行,毕竟水稻中做的芯片数据不如拟南芥那么全.

参考文献:
A transcriptome atlas of rice cell types uncovers cellular, functional and developmental...

甲型H1N1病毒检测试剂盒分析解释

emq798vg[1].jpg 昨天中国宣布成功研制出猪感染甲型H1N1病毒检测试剂盒,由于我是学生物的,于是就好好看了一遍,不过由于主攻方向不是这方面,所以只是以自己所学来解释分析这个试剂盒.

试剂盒理论上应该分为以下几个部分:
1.组织RNA的提取(病毒的遗传物质是RNA,而不是DNA)
2.RNA的纯化
3.RNA的反转录(RT-PCR)
4.PCR鉴定

新闻中提到"适用于检测猪组织、分泌物和培养物的甲型H1N1病毒核酸,应用该方法可在5小时内获得检测结果"。我就大致解释下这方面的时间

1.由于是检测猪组织分泌物和培养物,所以首先可以利用trizol进行RNA的提取.具体方法类似于 利用Trizol提取植物组织RNA ,这一步骤视材料多少大约需要40分钟到60分钟
2.由于提取的组织RNA中含有DNA组分,为了避免对结果产生影响,一般需要进行DNA酶解去除步骤,如果量大,则需要氯化锂沉淀纯化.考虑到试剂盒是快速检测,一般可能只是进行DNA酶处理去除DNA,方法类似于promega试剂盒,此过程大约需要50分钟到60分钟
3.RNA的反转录(RT-PCR),即将RNA反转录成DNA,方法参考fermentasRT-PCR试剂盒,此过程大约需要80分钟到90分钟
4.最后就是将得到的DNA进行PCR扩增,利用琼脂胶查看是否有H1N1的特异性条带.根据检测片段的长度,此过程时间最长,基本需要2小时到3小时.

综合算来,如果顺利的话基本能在5小时得到结果.
大致解释下,如果有错,多多交流~~~